反相色譜柱是氣液相的關(guān)鍵部件,主要由兩大類組成,毛細(xì)管柱和填充柱,其中毛細(xì)管柱由兩部分組成:管線和固定相,管線主要有熔融石英(管外涂漬了聚酰亞胺)和不銹鋼兩種。固定相是色譜分離的關(guān)鍵,它有很多種,大多數(shù)是高分子量、熱穩(wěn)定性好的聚合物,這些聚合物是液體或膠,常用的是聚硅氧烷(有時(shí)錯(cuò)誤的稱為硅橡膠)和聚乙二醇,還有另外常用的固定相是小的多孔顆粒,由聚合物和沸石(例如:氧化鋁和分子篩)組成,在色譜實(shí)驗(yàn)過(guò)程中選擇合適的反相色譜柱對(duì)實(shí)驗(yàn)的順利開(kāi)展和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的性而言是十分重要的。 反相色譜柱固定相的選擇
反相色譜柱固定相的選擇是關(guān)鍵,一般從以下幾個(gè)方面考慮:
1、氣相色譜中,兩種分析物由于其與固定相的相互作用不同而發(fā)生分離,因此必須選擇一個(gè)與樣品特性相匹配的固定相;
2、如果不知道使用何種固定相,可以從非極性和弱極性柱開(kāi)始使用,如果效果不好,再按極性漸強(qiáng)的順序選用中等極性直到性柱逐一嘗試,直到有較令人滿意的分析結(jié)果即可確定使用的柱極性;
3、低流失(“ms”)反相色譜柱通常更為惰性,有更高的溫度上限,適用于MS檢測(cè)器;
4、使用能夠提供滿意的分離度和分析時(shí)間的極性小的固定相,非極性固定相比極性固定相具有更長(zhǎng)的使用壽命;
5、要使用和被分析物極性相近的固定相,使用這一選擇方法常常是有效的;
6、如果被分析物具有不同的偶極和氫鍵力,改變使用具有不同偶極或氫鍵力(不一定大)的固定相后,會(huì)出現(xiàn)新的其他共流出物,所以新的固定相不一定提供更好的總分離度;
7、如果可能,要避免使用含有能使選擇性檢測(cè)器產(chǎn)生高響應(yīng)值功能團(tuán)的固定相,例如含有氰丙基的固定相,用NPD會(huì)產(chǎn)生不同比例的增大基線高度(由于柱流失);
8、PLOT柱用于在高于室溫的柱溫下來(lái)分析氣體樣品。
no.2反相色譜柱直徑的選擇
反相色譜柱直徑的選擇通常取決于儀器或檢查條件,大多數(shù)的現(xiàn)代化的氣相色譜設(shè)備都與大部分反相色譜柱的尺寸相兼容,內(nèi)徑增大,反相色譜柱的樣品容量增,但分離度和靈敏度降低。反之,尺寸較小的反相色譜柱,其分離度和靈敏度也相應(yīng)提高,但缺點(diǎn)是樣品容量減少,所需樣品量增多。的方法是找一個(gè)已有的色譜方法,并以此為基礎(chǔ)進(jìn)行優(yōu)化,不同的反相色譜柱直徑有不同的適用情況。
1、當(dāng)需要有高柱效的反相色譜柱時(shí)應(yīng)使用0.18-0.25mm的反相色譜柱,0.18mm的反相色譜柱很適用于泵容量低的GC/MS系統(tǒng),小內(nèi)徑柱的容量小而且需要的柱頭壓力;
2、當(dāng)需要樣品容量大時(shí)要使用0.32mm內(nèi)徑的反相色譜柱,與0.25mm的內(nèi)徑柱相比,0.32mm的內(nèi)徑柱對(duì)不分流進(jìn)樣或大體積(>2微升)進(jìn)樣時(shí)早流出的色譜峰有較高的分離度;
3、只有配備大口徑直接進(jìn)樣口時(shí),才使用0.53mm內(nèi)徑的反相色譜柱它特別適用于高載氣流速的應(yīng)用,例如吹掃捕集、頂空進(jìn)樣,0.53mm內(nèi)徑反相色譜柱在恒定的液膜情況下具有的樣品容量。