液相色譜柱的化學(xué)性質(zhì)包含哪些
液相色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗(yàn)積累。
隨著HPLC的普及,分析方法學(xué)的開發(fā)成為一個(gè)合格的分析研究員的標(biāo)配,而色譜柱的篩選是分析方法開發(fā)的一步,也是重要的一步,好的分析研究員可以根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特征很快確立所需的色譜柱,然后根據(jù)化合物的Pka,logP確立流動(dòng)相。
液相色譜柱的化學(xué)性質(zhì)有以下這些:
1、硅膠基質(zhì):通用的基質(zhì),強(qiáng)度大,化學(xué)修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達(dá)到1—12)。
2、聚合物基質(zhì):多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩(wěn)定,應(yīng)用pH范圍寬,具有更強(qiáng)的疏水性,對(duì)蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好;但強(qiáng)度較小,有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,批次重復(fù)性較差,商品化色譜柱不多,一般價(jià)格較貴。
3、載碳量:基質(zhì)表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。
4、鍵合相:鍵合試劑不同,對(duì)化合物的選擇性不同,一般長(zhǎng)鏈的烷基鍵合相(C18 C8)比短鏈的(C4 C3)穩(wěn)定;非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。
5、封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來(lái),以減少殘留的硅醇基,減輕待測(cè)組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對(duì)于極性樣品而言,未封端處理的色譜柱分離效果較差。
好了,以上便是關(guān)于液相色譜柱的相關(guān)內(nèi)容介紹了。