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一種新的研究方法的誕生,大多是為了彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問題,但對極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法,用己脘或環(huán)已脘來分析這些物質(zhì)也存在一些局限性,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上,誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜(HILIC)。在HILIC色譜柱上,物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì),在通常的實驗條件下,它們在HILIC柱上有較強(qiáng)的保留。恒譜生USHA C18-A色譜柱適用于分離強(qiáng)極性和親水性化合物,含碳量10%,ph值2-8范圍內(nèi),孔徑、粒徑、柱長多種規(guī)格可選。
HILIC柱的固定相是親水的,并且通常在一定pH范圍內(nèi)是帶電荷的。親水性越強(qiáng)的化合物,被保留的時間越長。和大多數(shù)其他液相色譜技術(shù)不同的是:HILIC的部分流動相是作為固定相的一部分來起作用的。色譜柱使用一段時間后會發(fā)現(xiàn)一些問題,比如柱效下架、分離效率變差等。當(dāng)你發(fā)現(xiàn)HILIC柱出現(xiàn)分離效率變差、保留時間改變和校準(zhǔn)曲線偏離等現(xiàn)象時,很可能色譜柱保留了一些不希望保留的物質(zhì),而使柱容量改變了。
如果柱壓升高,常常是因為樣品基質(zhì)中的某些組分形成沉淀,堵塞了色譜柱入口的多孔濾片。恒譜生建議使用強(qiáng)緩沖液或鹽溶液在低流速下反向沖洗色譜柱來部分恢復(fù)柱子的性能。如果是柱效下降,可以考慮是否是死體積太大導(dǎo)致降低柱效。為減小死體積,色譜系統(tǒng)里所有的連接管線應(yīng)盡可能的短。但是為了將峰加寬減至最小,且不降低柱效,用減小系統(tǒng)中連接各部件的所有管線內(nèi)徑來減小死體積的效果是很有限的,這樣柱反壓會增大,并且會造成意外管線堵塞等。恒譜生PEEK管線具有優(yōu)異的耐化學(xué)能力和生物可兼容性,PEEK管線能夠耐受鹵化鹽類、強(qiáng)緩沖液、強(qiáng)活性的流動相的侵蝕,適用范圍廣。